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样品的收集和保存

样品的收集和保存:

1. 血清样品:将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置 2 小时或 4℃ 过夜,然后 1,000×g 离心 15 分钟,取上清即可,将上清置于≤-20冷冻保存,避免反复冻融。

2. 血浆样品:用 EDTA或肝素钠抗凝管采集标本,并将标本在采集后的 30 分钟内于 4℃冰箱,1,000×g 离心 15 分钟, 取上清即可检测,或将上清置于≤-20冷冻保存,避免反复冻融。

3. 组织匀浆:
A、在预冷 PBS(0.01mol/L, pH=7.0-7.2)中清洗去除血液,低温切割标本后,准确称取组织重量。

B按重量(g):体积(mL)=1:9的比例,加入9倍体积的匀浆介质PBS。用手工或匀浆器将标本充分匀浆

C、3000 ×g离心15分钟仔细收集匀浆上清,弃沉淀,(如需要可取部分进行BCA蛋白定量)≤-20℃以下保存。

4. 细胞裂解液:在分析试验之前,细胞需利用以下方法处理:
A、贴壁细胞应该用冷 PBS 轻轻清洗,然后用胰蛋白酶消化,于 1,000×g 离心 5 分钟后收集,(悬浮细胞通过离心直接收集),将收集到的细胞用冷 PBS 洗3次。

B PBS 稀释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万/ml 左右。通过超声破碎或反复冻融方式,以使细胞破坏并放出细胞内成份。3000 ×g离心15分钟仔细收集上清≤-20冷冻保存。

5. 细胞培养上清或其它生物体液标本:请 3,000×g 离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于≤-20℃冷冻保存,避免反复冻融。

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