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检测流程:
1. 加 样: 空白孔加入50μl标准品/样品稀释液,其余孔各对应加入标准品或待测样品50ul,将酶标板用封板膜封好,轻轻混匀后置37℃,孵育50分钟。
2. 洗 板: 用洗涤液(1×)将酶标板充分洗涤 3 次,每孔加入洗液 300μl,每次震荡/浸泡 1-2 分钟,向滤纸上印干。
3. 孵育抗体:空白孔加入100ul的抗体稀释液,其余孔各加入检测抗体工作液 100ul,将酶标板用封板膜封好,轻轻混匀后置37℃,孵育50分钟。
4. 洗 板: 同上。
5. 孵育SABC:空白孔加入100ul的SABC稀释液,其余孔各加入SABC工作液 100ul,将酶标板用封板膜封好,轻轻混匀后置37℃,孵育30分钟。
6. 洗 板: 同上。
7. 显 色:每孔加入提前配置好的TMB混合液100ul,将酶标板用封板膜封好, 轻轻混匀后置37℃,暗处反应8-20分钟,反应结果为蓝色。
终止反应:每孔加入50ul 终止液,轻轻混匀,此时蓝色转为黄色,20 分钟内用酶标仪在 450nm 处测OD值。